| A májsejt endoplazmatikus retikulum két membránkötött enzimének, az L-aszkorbinsav bioszintézis, utolsó lépését katalizáló l-gulono--lakton oxidáznak (GLO), és a glikogenolízis, glukoneogenezis végső közös lépését katalizáló glukóz-6-foszfatáz fötális formájának az orientációját és a hozzájuk kapcsolódó transzport folyamatokat vizsgáltuk patkány máj mikroszómális vezikulumokban. Kimutattuk, hogy a l-gulono--lakton oxidáz katalitikus aktivitása preferenciált intraluminális glutation oxidációhoz és intraluminális aszkorbát akkumulációhoz vezet. Megállapítottuk, hogy a gulonolakton oxidáz aktív helyének irányultsága intraluminális, vagy az enzim termékeit az endoplazmatikus retikulum lumene felé továbbítja. Jellemeztük az aszkorbinsav és a dehidroaszkorbinsav transzportját patkány máj mikroszómán. Mindkét komponens felvételét idő- és hőmérséklet-függőnek és telíthetőnek találtuk. Az aszkorbát felvétel nem érte el a passzív ekvilibriumot, alacsony affinitású és nagy kapacitású, gátolható anion traszport gátlók adásával. Ezzel szemben kimutattuk, hogy a dehidroaszkorbát transzport meghaladja a passzív ekvilibriumot, magas affinitású és alacsony kapacitású, a transzport glukózzal és glukóz transzport gátlókkal csökkenthető. Eredményeink alapján arra a következtetésre jutottunk, hogy a májsejt endoplazmatikus retikulumában a dehidroaszkorbát transzport preferált az aszkorbát transzporttal szemben, a transzportot GLUT típusú transzporter végzi. Bebizonyítottuk, hogy a fötális glukóz-6-foszfatáz látencia hiányának az oka a katalitikus alegység megváltozott membrán toplológiája. Kimutattuk, hogy a glukóz-6-foszfát, foszfát és glukóz transzport fötális mikroszómán is jelenlévő, a felnőtt formához hasonló. Megállapítottuk, hogy a glukóz-6-foszfatáz rendszer komponensei jelen vannak a fetális máj endoplazmatikus retikulumában, de a foszfohidroláz aktivitás a transzporttól funkcionálisan szét van kapcsolva a katalitikus hely extraluminális orientációja következtében. |